Caracterización de dos anticuerpos monoclonales hacia las fimbrias K99

  • Jesús A Junco Barranco Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología de Camagüey
  • Ana C Campal Espinosa Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología de Camagüey
  • Antonio Miranda Cruz Centro de Ingeniería de Genética y Biotecnología de Camagüey, Cuba
  • María Dolores Castro Santana Centro de Ingeniería de Genética y Biotecnología de Camagüey, Cuba
  • Sonia Casas Suárez Centro de Ingeniería de Genética y Biotecnología de Camagüey, Cuba
  • Niurka Arteaga Moré Centro de Ingeniería de Genética y Biotecnología de Camagüey, Cuba
  • Lisset León Barreras Centro de Ingeniería de Genética y Biotecnología de Camagüey, Cuba

Resumen

Las  fimbrias  K99  son   una   de   las  proteínas encargadas  de   la  adhesión  y colonización del intestino delgado del hospedero comúnmente expresadas  por cepas porcinas y bovinas de  Escherichia coli enterotoxigénica (ECET).  Con  el objetivo  de  diseñar  sistemas para   el  diagnóstico  de  los  diferentes  tipos  de fimbrias expresadas por las ECET,  se obtuvieron dos anticuerpos monoclonales contra  el  antígeno fimbrial  K99. Los determinantes  antigénicos  reconocidos por los dos anticuerpos fueron caracterizados por  ensayos inmunoenzimáticos tipo ELISA con antígenos relacionados, análisis de epítopes por competencia, experimentos  de  aglutinación  con  cepas referentes  y Western Blot;  también  se les  determinó  la  constante de  afinidad.  Los anticuerpos  obtenidos  reconocen a un   epítope  conformacional   presente  en   la   fimbria   nativa.   Los  resultados demuestran la utilidad de  estos anticuerpos para  el diseño de  sistemas para  el diagnóstico y el monitoreo de  la producción del antígeno K99 presente en  un preparado vacunal.

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Citas

ANDERSON, D. G. Y S. L. MOSELEY: Escherichia coli F41 Adhesin: Genetic

Organization, Nucleotide Sequence and Homology with the K88 Determinant,

Journal of Bacteriology, 170 (10): 4890-4896, 1988.

BEATTY J. D.; B. G. BEATTY, W. G. VLAHOS Y L. R HILL: Method of Analysis of Non-Competitive Enzyme Immunoassays for Antibody Quantification, J. Immunol. Methods, 100 (1-2): 161-172, 1987.

BORROTO, A.; R. BASALTO, M. MORENO, R. SILVA, I. WONG Y E. BOVER: Clonaje de las subunidades fímbricas K88ab y K99 e identificación de cepas de E. coli enterotoxigénicas aisladas de animales enfermos, Biotecnología Aplicada

: 148-155, 1992.

CANAL, A. M.; V. G. CUBILLOS, J. ZAMORA, G. REINHARDT, E. PAREDES, R. IDEFONSO, A. ALBERDI Y P. MACÍAS: Técnicas inmunohistoquímicas para la identificación de antígenos fimbriables de E. coli enteropatógeno, Arch. Med. Vet., 31 (1): 1-12, 1999.

CAMPAL, ANA; MARÍA CASTRO, J. JUNCO Y SONIA CASAS: Caracterización parcial de un epítope de la fimbria k88ab, Rev. prod. anim., Universidad de Camagüey, Cuba (aparece en este número).

DAVIS, A. C. Y M. J. SHULMAN: IgM- Molecular Requirements for its Assembly and Function, Immunology Today, 10: 122-188, 1989.

DE GRAAF, F. K.; P. KLAASEN–BOOR Y J. E. VAN HEES: Biosíntesis of the

K99 Surface Antigen is Repressed by Alanine, Infection Immunity, 30: 125-128,

DE GRAAF, F. K. E I. ROORDA: Production, Purification and Characterization of the Fimbrial Adhesive Antigen F41 Isolated from calf enteropathogenic Escherichia coli strain B41M, Infect Immun., 36: 751-758, 1982.

DUARTE, C.; M. E. FERNÁNDEZ-DE COSSIO, G. SIERRA E. PENTÓN, A. AGRAZ Y G. FURRAZOLA: Anticuerpos monoclonales de ratón contra el interferón recombinante alfa-2. Su empleo en la purificación y detección del antígeno, Interferón y Biotecnología, 4: 221-232, 1987.

KHATIB, L. A.; Y. L. TSAI Y B. H. OLSON: A Biomarker for the Identification of Cattle Fecal Pollution in Water Using the LTIIa Toxin Gene from Enterotoxigenic Escherichia coli, Appl. Microbiol. Biotechnol., Jun, 59 (1): 97-104, 2002.

LAEMLI, U. K.: Cleavaje of Structural Proteins During the Assembly of the Laemli

Head of Bacteriophage T4, Nature, 277: 680-685, 1970.

LINDAHL, M.; R. BROSSMER T. WADSTRÖM: Carbohydrate Receptor Specificity of K99 Fimbriae of Enterotoxigenic Escherichia coli, Infection and Immunity, 57, 11: 3452-3457, 1987.

MARIANI, M.; M. CIANFRIGLIA Y A. CASSONE: Is Mouse IgM Purification on

Protein A possible? Immunol. Today, 10: 115–116, 1991.

MOON, H. W. Y T. O. Bunn: Vaccines for Preventing Enterotoxigenic Escherichia coli Infections in Farm Animals, Vaccine, 11 (2): 213, 1993.

MOSELEY, S. L.; G. DOUGAN, R. A. SCHNEIDER Y H. W. MOON: Cloning Chromosomal DNA Encoding the F41 Adhesin of Enterotoxigenic E. coli and Genetic Homology Between Adhesin F41 and K88, J. Bacteriol., 16: 779-804,

OGUNNIYI, A. D.; I. KOTLARSKI, R. MORONA Y P. A. MANNING: Epitope Analysis of the FanC Subunit Protein of the K99(F5) Fimbriae of Enterotoxigenic Escherichia coli Using a Recombinant Fusion Technique, FEMS Immunol. Med. Microbiol., Sep. 6; 34 (1): 23-31, 2002.

OUCHTERLONY, O.: Handbook of Experimental Immunology, Third Edition, p.

, Blackwell Scientific Publications, Oxford, 1978.

PHARMACIA-LKB: Theory and practice, Sweeden, 1986

ROOSENDAAL, B.; W. GAASTRA Y F. K. DE GRAAF: The Nucleotide Sequence of the Gene Encoding the K99 Subunit of Enterotoxigenic Escherichia coli, FEMS Microbiology Letters, 22: 253-258, 1984.

RUNNELS, P. L.; S. L. MOSELEY Y H. W. MOON: F41 Pili as Protective Antigens of Enterotoxigenic Escherichia coli that Produce F41, K99, or Both Pilus Antigens, Infection and Immunity, 55 (3): 555-558, 1987.

STONE, G. C.; U. SJÖBRING, L. BJÖRCK, J. SJÖQUIST, C. V. BARBER Y F. A. NARDELLA: The Fc Binding Site for Streptoccocal Protein G is in the Cγ2 - Cγ3 Interface Region of IgG and is Related to the Sites that Bind Staphyloccocal Protein A and Human Rheumatoid Factors, J. of Immunology, 143, (2): 565-570,

TOWBIN, H.; T. STAEHELIN Y J. GORDON: Electrophoretic Transfer of Proteins from Polyacrylamide Gels to Nitrocellulose Sheets: Procedure and Some Applications, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 76: 4350-4359, 1979.

VAN DER WOUDE, M. W.; P. A. ARTS, F. DE GRAAF, H. W. VAN VERSELD Y F. K. DE GRAAF: Growth-Rate Dependent Synthesis of K99 Fimbrial Subunits is Regulated at the LEVEl of Transcription, Journal of General Microbiology, 136:

-903, 1990.

VAN ZIJDERBELD, F. G.; F. WESTENBRINK, J. ANAKOTTA, R. A. M. BROUWERS, Y A. M. VAN ZIJDERVELD: Characterization of F41 Antigen of Enterotoxigenic Escherichia coli by Using Monoclonal Antibodies, Infection and Immunity, 57 (4): 1192-1199, 1989.

VAN ZIJDERBELD, F. G.; J. ANAKOTTA, R. A. M. BROUWERS, A. M. VAN ZIJDERVELD, D. BAKKER Y F. K. DE GRAAF: Epitope Analysis of the F4 (K88) Fimbrial Antigen Complex of Enterotoxigenic Escherichia coli by Using Monoclonal Antibodies, Infection and Immunity, 58 (6): 1870-1878, 1990. VAZQUEZ, F.; E. A. GONZALEZ, J. I. GARABAL Y J. BLANCO: Fimbriae Extracts from Enterotoxigenic Escherichia coli Strains of Bovine and Porcine Origin with K99 and/or F41 Antigens, Vet Microbiol., Feb;48 (3-4): 231-41, 1996. ILSON, M. B. Y P. K. NAKANE: Immunoflourescence and Related Staining Technique, p. 215, Elsevier/North Holland Biomedical Press, Amsterdam, 1978. WRAY, C. Y M. J. WOODWARD: Escherichia coli Infections in Farm Animals. pp. 49-84, Ed M. Summon (ed.) Escherichia coli mechanism of virulence, Cambridge University Press, Cambridge, England, 1997.

Publicado
2019-10-17
Cómo citar
Junco Barranco, J., Campal Espinosa, A., Miranda Cruz, A., Castro Santana, M., Casas Suárez, S., Arteaga Moré, N., & León Barreras, L. (2019). Caracterización de dos anticuerpos monoclonales hacia las fimbrias K99. Revista De Producción Animal, 15(2). Recuperado a partir de https://revistas.reduc.edu.cu, revistas.reduc.edu.cu, revistas.reduc.edu.cu/index.php/rpa/article/view/3187
Sección
Salud Animal

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